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室温下，用两种一抗（溶于 1% BSA 的 PBST 中）在湿盒中孵育细胞 1 小时，或 4 ℃ 过夜孵育。 室温下，在 4% 多聚.甲醛（溶于 PBS 中，pH 7.4）中孵育细胞 10 分钟。 用冰 PBS 洗涤细胞 3 次。 确保抗体来源于不同物种并且这些抗体有相应的二抗。 例如，抗抗原 A 的兔抗体和抗抗原 B 的鼠抗体。 也可使用偶联至不同荧光团的直标一抗。 将抗原修复缓冲液（100 mM Tris，5% [w/v] 尿素，pH 9.5）预热至 95 ℃。 使用ICC(C,1)模型进行分析，得到ICC组内相关系数为0.7148，95%CI为0.3364~0.9271。 变性人色情视频 ICC组内相关系数介于0.6和0.8之间，说明3位专家的打分一致性程度较强。 研究3位专家对8名同学的智商打分值的一致性，此类情况可使用ICC组内相关系数，或者Kendall W协调系数进行一致性检验。 本案例为定量数据进行一致性测量，一般使用ICC组内相关系数进行分析。 如果不需要考虑系统误差时，此时选择一致性计算类型。 特别说明一点在于，单向模型只有绝对一致性。 ICC组内相关系数是用于研究评价一致性，评价信度，测量复测信度（重测信度）的一种研究方法。 比如3个医生对于同一组患者进行评分，判断此3位医生评价结果的一致性水平情况。 同时组内相关系数ICC也用于测量复测信度。 平均度量：比如多位医生通过对抑郁症患者进行多项测试，得出平均值，进行打分，此时的数据为多项测试平均后的得分，故应该使用平均度量。 单一度量：比如多位医生通过一项测试对抑郁症患者进行抑郁程度打分。 室温下，用第二种一抗（溶于 1% BSA